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高效液相色谱法测定术后饮中*的含量

2024/4/10 6:44:37发布25次查看
摘要:*为*类药,用于增强****的韧性。橙皮甙的衍生物甲基橙皮甙,也是*类药,是日本《食品添加物公定书》中收载的品种。是**高血压和心肌梗塞的**,医药工业中用作制药的原料,是中成药脉通的主要组成之一。
目的建立术后饮中*含量的测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为centurysilc18-aq(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液(21∶79),流速为0.8ml/min,检测波长为284nm,柱温为室温,进样量为20μl。结果*浓度在1.004~10.04μg范围内线性关系良好,平均回收率为98.59%,rsd=0.72%。结论方法简便、准确、重复性好,可作为术后饮中*的含量测定方法。
「关键词」高效液相色谱法;术后饮;*;含量测定keywords:hplc;shuhouyin;hesperidin;contentdetermination术后饮系甘肃武威肿瘤医院研制的医院制剂,是由**参、白花蛇舌草、陈皮、甘草等药味制成的合剂,具有补气**、**宽中、降逆下气的功能,用于手术后气血亏虚所致的腑气不通诸症的**。经过临床多年使用,疗效显著。为控制其质量,参考文献[1-6],采用高效液相色谱(hplc)法对方中君药陈皮的主要有效成分*进行了含量测定,结果方法简便、准确、重复性好,为术后饮质量标准的研究与指标的制定提供了试验依据。
1仪器与试药ssipc-2000型高效液相色谱仪,model500紫外检测器,7725i手动进样阀,分析之星色谱工作站;xt120a电子分析天平(瑞士普利赛斯);hs10260d*(天津市恒奥科技发展有限公司)。
*对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号110721-200512,供含量测定用);术后饮样品及缺陈皮的阴性对照样品均由甘肃武威肿瘤医院提供(批号060810,060812,060815)。水为重蒸馏水,乙腈为色谱纯,聚酰胺为层析用试剂(80~100目),其余试剂均为分析纯。
2方法与结果2.1色谱条件色谱柱:centurysilc18-aq(250mm×4.6mm,5μm,大连江申分离科学技术公司);流动相:乙腈-0.2%磷酸溶液(21∶79);流速:0.8ml/min;检测波长:284nm;柱温:室温;进样量:20μl。在上述色谱条件下,*与相邻峰达到基线分离,且阴性对照无干扰,峰形对称,分离效果良好。色谱图见图1。
2.2对照品溶液的制备精密称取*对照品25.1mg,置25ml量瓶中,加甲醇适量,超声助溶,然后用甲醇溶解至刻度,摇匀,配成浓度为1.004mg/ml的甲醇溶液,精密吸取2ml置10ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。
2.3供试品溶液的制备精密量取本品10ml,置具塞锥形瓶中,加硅藻土5g,搅拌均匀,烘干,精密加入甲醇120ml,称定重量,充分搅拌,超声40min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液100ml置蒸发皿中,水浴蒸干,残渣用70%乙醇100ml使溶解并转移至分液漏斗中,加石油醚(60~90℃)萃取3次(50、30、20ml),弃去石油醚液,分取70%乙醇液置蒸发皿中,蒸去乙醇,剩余水液上聚酰胺层析柱(1cm×25cm层析柱,称聚酰胺1.8g,湿法装柱),先用20ml水冲洗(6ml/min),再加入70ml甲醇冲洗,收集甲醇液水浴蒸干,残渣用甲醇溶解并定容至10ml容量瓶中,用0.45μm微孔滤膜过滤后备用。
2.4线性关系考察精密吸取上述*浓度为1.004mg/ml的甲醇溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml,分别置10ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,在上述色谱条件下分别进样20μl,测定。以峰面积对浓度进行线性回归,得回归方程为:a=.6c+91201.7,r=0.9997。表明*浓度在1.004~10.04μg范围内线性关系良好。
2.5精密度试验精密吸取对照品溶液20μl,重复进样5次,计算5次峰面积的rsd=0.83%。
2.6稳定性试验取室温放置的对照品溶液,在上述色谱条件下,于0、1、2、4、8、24h分别进样20μl,测定峰面积的rsd=0.71%,表明*甲醇溶液在24h内稳定。
2.7重复性试验精密量取供试品(批号060812)10ml各5份,按“样品测定”项下操作,计算含量,结果分别为0.2161、0.2149、0.2181、0.2185、0.2171㎎/ml,平均含量为0.2169mg/ml,rsd=0.94%。
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